Studio sull'applicazione della tripla selezione spermatica e il suo successo nell'ovodonazione

Studio sull'applicazione della tripla selezione spermatica e il suo successo nell'ovodonazione

Nei trattamenti di FIV, processare il seme è uno strumento fondamentale per migliorare i risultati di un trattamento. Fino ad ora le tecniche piú utilizzate in tutti i laboratori sono lo Swim-Up e i gradienti di densitá. Nella nostra clínica, FIV Marbella, abbiamo introdotto una tripla selezione di spermatozoi: gradienti + colonne di annessina + PICSI .

Obbiettivi

L’obbiettivo di questo studio è dimostrare se esiste una differenza nei tassi di fecondazione, di blastulazione e gravidanza (B-HCG positive) utilizzando la tripla selezione spermatica al posto dei trattamenti nei quali sono state utilizzate tecniche convenzionali.

Materiali e metodi

Lo studio è stato realizzato analizzando cicli di ovodonazione con sperma di coppia in fresco, realizzando la tripla selezione solo in quei campioni che permettevano l’esecuzione delle diverse tecniche di laboratorio.
Per realizzare la tripla selezione spermatica, sommettiamo il campione di sperma a un gradiente di densitá discontinuo all’80% e 40% (Suprasperm 100%, SAGE), gli spermatozoi ottenuti passano per la colonna di annessina (MACS, Miltenyi Biotec) selezionando quelli non apoptotici e infine gli spermatozoi recuperati, sono selezionati per mezzo del PICSI (SpermSlow, Origio) per selezionare gli spermatozoi maturi e non apoptotici. Nei trattamenti in cui non applichiamo una tripla selezione degli spermatozoi, le tecniche utilizzate per la recuperazione spermatica sono i gradienti di densitá e lavaggio, tecniche efffettuate a quei campioni che, essendo di cattiva qualitá, non permettono la realizzazione di nessun’altra tecnica alternativa al lavaggio seminale per concentrare il campione.
La media di ovuli usata per ogni trattamento di ovodonazione è di 8,85 ovociti per ricevente. La microiniezione degli ovuli freschi si realizza dopo 40 ore dal Decapeptyl e se ne studia la fecondazione alle 18 ore post-ICSI, studiando la corretta fecondazione degli ovociti in quelli che presentano 2 pronuclei e 2 corpuscoli polari.
È stato realizzato una coltura prolungata degli embrioni fino a G+5/G+6 in mezzo unico (1-Step – Origio), in cui se ne studia la qualitá per il trasferimento e/o vitrificazione.
I tassi sono stati calcolati in funzione dei trattamenti realizzati nel 2015 e 2016.

Risultati

Come si osserva dai risultati, i tassi di fecondazione, blastulazione e B-HCG positive non presentano differenze nei tassi di fecondazione, peró sí si evidenziano differenze tra i vari trattamenti, nei tassi di blastulazione e nel tasso delle B-HCG positive.

  N % Fecondazione % Blastulazione B-hCG
Senza tripla selezione 119 79,04% 67,82% 66,28%
Con tripla selezione 34 78,96% 61,89% 53,57%

 

Conclusioni

In teoria, quando realizziamo la tripla selezione spermatica, garantiamo che questa azione congiunta di tecniche ci permette selezionare quello spermatozoo con le migliori caratteritiche morfologiche, mobili e molecolari, anche se, secondo il nostro studio ci sono differenze tra i tassi di blastulazione e B-HCG positive studiate quando facciamo la tripla selezione.
Ci sentiamo di sottolineare che la differenza di “n” tra i trattamenti puó essere determinante al momento di dare risultati piú affidabili, per cui continueremo a lavorare con lo scopo di aumentare la “n” dei trattamenti con la tripla selezione e dimostrare se veramente le differenze possono essere significative o meno.

Autori: Renilla, B., Criado E.

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